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pcr实验室被核酸污染怎么办?

pcr实验室被核酸污染怎么办?

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  • 发布时间:2022-05-13
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【概要描述】为了对新冠疫情防控的常态化管理做好准备,目前国内很多地区都有建设自己的PCR实验室,早在先前,国家卫健委发布《关于加快推进新冠病毒核酸检测的实施意见》,强调了扩大核酸检测范围的重要性,明确了扩大检测范围的能力要求。《实施意见》提出从加强实验室建设、强化质量控制和生物安全、加强人员规范培训、加快设备产能提升、确保信息安全畅通等5个方面推进加快提升检测能力,全力满足检测需求。特别强调各地要加强三级医院、传染病专科医院、县(区)级及以上疾控机构、海关及有条件的县医院实验室建设,使其具备开展新冠病毒检测能力。这意味着许多医疗机构都要建立核酸检测实验室。

pcr实验室被核酸污染怎么办?

【概要描述】为了对新冠疫情防控的常态化管理做好准备,目前国内很多地区都有建设自己的PCR实验室,早在先前,国家卫健委发布《关于加快推进新冠病毒核酸检测的实施意见》,强调了扩大核酸检测范围的重要性,明确了扩大检测范围的能力要求。《实施意见》提出从加强实验室建设、强化质量控制和生物安全、加强人员规范培训、加快设备产能提升、确保信息安全畅通等5个方面推进加快提升检测能力,全力满足检测需求。特别强调各地要加强三级医院、传染病专科医院、县(区)级及以上疾控机构、海关及有条件的县医院实验室建设,使其具备开展新冠病毒检测能力。这意味着许多医疗机构都要建立核酸检测实验室。

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为了对新冠疫情防控的常态化管理做好准备,目前国内很多地区都有建设自己的PCR实验室,早在先前,国家卫健委发布《关于加快推进新冠病毒核酸检测的实施意见》,强调了扩大核酸检测范围的重要性,明确了扩大检测范围的能力要求。《实施意见》提出从加强实验室建设、强化质量控制和生物安全、加强人员规范培训、加快设备产能提升、确保信息安全畅通等5个方面推进加快提升检测能力,全力满足检测需求。特别强调各地要加强三级医院、传染病专科医院、县(区)级及以上疾控机构、海关及有条件的县医院实验室建设,使其具备开展新冠病毒检测能力。这意味着许多医疗机构都要建立核酸检测实验室。

PCR实验,即临床基因扩增实验,是专门用来检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一种检测手段。它可以通过将病毒体内所含的基因进行扩增的方法,测出一些病毒含量不高的感染者体内是否含有特定的病毒。就新冠病毒核酸检测来说,RT-PCR是目前使用最广泛和较准确的筛选和确认方法。大规模核酸检测,必然会引起相关机构单位着力建设规范的临床PCR实验室。但是,建立一个PCR实验室,其实就是在建设一个平台,考验的不仅仅是一个医疗机构的实验能力,也考验着整个医疗机构的整体能力。

 

而取决于核酸实验室设计的核心问题是什么?“避免污染”是临床基因扩增检验实验室设计的核心。核酸检测反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但在操作过程中易受到污染,极微量的污染都会造成假阳性。去除核酸污染分为两个方面,一方面是为了杀灭实验室空间内的微生物,另一方面是防止外源DNA污染,避免影响检测结果的准确性

 

避免污染的前提,我们需要先了解污染来源都有哪些?

1、样本间交叉污染:收集样本的容器被污染或样本密封不严导致外溢;不同样本移液时忘记更换枪尖或未使用带滤芯枪尖;移液器等实验器具及耗材未及时消毒灭菌;不同样本同时开盖或样本剧烈震荡、反复吹吸导致气溶胶形成扩散,相互交叉污染。

2、实验试剂污染:主要是在 PCR 组分试剂加样过程中,由于移液器、容器、阴性对照及其它试剂被核酸模板或阳性对照污染。加样过程中,因为PCR试剂对温度十分敏感,需要通过冰浴使得PCR试剂和PCR板/管处于0℃,但这个过程也充满污染风险。

3、扩增产物污染:大量拷贝的产物泄漏或扩增后的PCR反应管意外开盖,这是PCR反应中最主要、最常见的污染问题。因为PCR产物拷贝量大,远远高于PCR检测数个拷贝的极限,所以极微量的PCR产物污染,就可形成假阳性。

4、克隆质粒污染:作为阳性质控品的克隆质粒外溢。

 

我们可以通过以下措施降低污染机会:

1、正确佩戴手套:手套未紧密贴合拇指、食指和中指,在进行开盖操作时容易发生交叉污染。

2、正确使用生物安全柜:简单、整洁、避免通风口堵塞;操作前后紫外线照射,消毒剂随手可及;废液缸里有1/3体积的含氯消毒液,并且及时清理废液缸,保证废物不超过废液缸体积的2/3。

3、重视通风:不定期对房间进行通风,每次至少持续30min。

4、PCR扩增区去污染:PCR反应管必须盖紧,避免扩增后的核酸对环境的污染。

5、核酸提取仪去污染:每天多批次检测时,在每一批次检测完以后必须用75%的乙醇和核酸去除剂对仪器进行去污染。

6、实验室随手可及的消毒剂。

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